BJ5183-AD-1 電擊感受态細胞-上海帛科生物技術有限公司

BJ5183-AD-1 電擊感受态細胞

起訂量 (瓶)價格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

産地：進口、國産

貨号：BK-G63246

發布日期： 2021-02-21
更新日期： 2025-03-21

發送咨詢信息

産品詳請

産地	進口、國産
保存條件	低溫冷藏
品牌	帛科
貨号	BK-G63246
用途	産品僅用于科研
組織來源	詳見說明書
細胞形态	詳見說明書
是否是腫瘤細胞	否
CAS編号
保質期	詳見說明書
器官來源	詳見說明書
免疫類型	詳見說明書
品系	詳見說明書
生長狀态	詳見說明書
物種來源	詳見說明書
包裝規格	50ul5 50ul50
純度	%
是否進口	是

規格參數：

産品名稱：BJ5183-AD-1 電擊感受态細胞
規格：50ul*5 50ul*50
分類：克隆感受态細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加幹冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀）幹冰運輸，單加10kg幹冰費
單位: 袋

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨号21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度爲70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）複蘇細胞：将含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，加入1mL培養基後吹勻。然後将所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養液後吹勻，将細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

1. 感受态細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鍾内加入目标DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。

2. 混入質粒或連接産物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接産物可相應減少最終用于塗闆的菌量。
同一批感受态細胞，用含目的片段的T載體質粒轉化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接産物轉化，卻一個菌都沒長出來，重複了三次都這樣。請問這是感受态細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切後的質粒作爲另一個陰性對照，确定酶切是否完全。同時連接前請确定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受态細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉化質粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況，是可以用來轉化的，但是由于凍存時間過長，轉化效率會有所下降，如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較爲新鮮的感受态細胞。
操作方法：
1. DH5α感受态細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鍾後待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接産物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鍾。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鍾，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻後37℃，200 rpm複蘇60分鍾。
4. 5000 rpm離心一分鍾收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并塗布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.将平闆倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，将平闆放37℃培養至少15小時。

轉染試劑（溶液）質量規格：>95%，分子生物學級Transfection Reagents-Biofection 大鼠細胞因子ELISA檢測試劑盒RatlymphocytefactorELISAKit 96T/48T 石蠟切片結締組織(CONNECTIVETISSUE)馬森(MASSON)染色試劑盒50

反式肉桂醛(>95%，BR)質量規格：>95%，BRtrans-Cinnamaldehyde 人c-sis 試劑盒 Human c-sis ELISA Kit ELISAKitTn-Ⅰ人肌鈣蛋白Ⅰ規格：48T/96T

富勒烯 C60()，球 C60質量規格：>99.5%(HPLC)Fullerene C60 (pure) 英文名稱MouseU-TSHELISAKit小鼠高靈敏度激素(U-TSH)規格：96T/48T 大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒組裝/原裝

焦1酸(>45%，BR)質量規格：>45%，BRPyrophosphoric acid 冰凍切片組織化學AP酶聯NBT/BCIP間接檢測試劑盒(含AP二抗)20 人胃泌素(Gasin)試劑盒 Human Gasin ELISA Kit

犬胰蛋白酶(ypsin)試劑盒 Canine ypsin ELISA Kit 18607-90-4卡枯醇說明書 kakoul

英文名稱MouseSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit小鼠5-羟色氨(5-HT)規格：96T/48T 58-55-9茶堿品牌 Theophylline

差異相減雜交試劑盒10 34271-54-0茶氨酸規格 Theanine

Ratfreefattyacids,FFAELISA試劑盒大鼠遊離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規格：96T/48T 30462-34-1茶黃素-3-沒食子酸酯 Theaflavin-3-Gallate(TF-3-G)

小鼠組蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)ELISA試劑盒，英文名： HDAC4 ELISA Kit 28543-07-9茶黃素-3＆#146;-沒食子酸酯說明書 Theaflavin-3＆#146;-Gallate (TF-3＆#146;-G)

83-86-3植酸品牌 Phytic acid 組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20

83-67-0可可堿品牌 Theobromine 組織FGFR1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

83-49-8豬去氧膽酸 Hyodeoxycholic acid 組織EPHA3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

83-48-7豆甾醇品牌 Stigmasterol 組織EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性檢測試劑盒20

BJ5183-AD-1 電擊感受态細胞83-46-5β-谷甾醇說明書 β-Sitosterol 組織D-乳酸比色法定量檢測試劑盒20

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