EPI300 電擊感受态細胞-上海帛科生物技術有限公司

EPI300 電擊感受态細胞

起訂量 (瓶)價格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

産地：進口、國産

貨号：BK-G63255

發布日期： 2021-02-21
更新日期： 2025-03-21

發送咨詢信息

産品詳請

産地	進口、國産
保存條件	低溫冷藏
品牌	帛科
貨号	BK-G63255
用途	産品僅用于科研
組織來源	詳見說明書
細胞形态	詳見說明書
是否是腫瘤細胞	否
CAS編号
保質期	詳見說明書
器官來源	詳見說明書
免疫類型	詳見說明書
品系	詳見說明書
生長狀态	詳見說明書
物種來源	詳見說明書
包裝規格	50ul5 50ul20
純度	%
是否進口	是

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨号21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度爲70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）複蘇細胞：将含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，加入1mL培養基後吹勻。然後将所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養液後吹勻，将細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

規格參數：

産品名稱：EPI300 電擊感受态細胞
規格：50ul*5 50ul*20
分類：克隆感受态細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加幹冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀）幹冰運輸，單加10kg幹冰費
單位: 袋

注意事項：

1. 感受态細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鍾内加入目标DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接産物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接産物可相應減少最終用于塗闆的菌量。
同一批感受态細胞，用含目的片段的T載體質粒轉化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接産物轉化，卻一個菌都沒長出來，重複了三次都這樣。請問這是感受态細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切後的質粒作爲另一個陰性對照，确定酶切是否完全。同時連接前請确定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受态細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉化質粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況，是可以用來轉化的，但是由于凍存時間過長，轉化效率會有所下降，如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較爲新鮮的感受态細胞。

重樓皂苷VII（标準品）質量規格：HPLC≥98%，标準品Polyphyllin VII humansnailhomolog2,SNAI2ELISAKit人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒規格：96T/48T 人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)ELISA試劑盒，英文名： ai-Q-Ab ELISA Kit

豬去氧膽酸質量規格：≥97%,BRHyodeoxycholic acid 小鼠白介素16(IL16)ELISA試劑盒，英文名： IL16 ELISA Kit RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規格：96T/48T

豬去氧膽酸(标準品)質量規格：含量測定Hyodeoxycholic acid 人組胺(HIS)ELISA檢測試劑盒humanHistamine,HISELISAKIT 96T/48T Humangolgiprotein73,GP-73ELISA試劑盒人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒規格：96T/48T

制黴素（标準品）質量規格：效價測定Nystatin 大鼠金屬硫蛋白2(MT-2)試劑盒 Rat Metallothionein-2,MT-2 ELISA Kit HumanLactateDehydrogenase，LDHELISAKit人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規格：96T/48T

RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISA試劑盒大鼠遊離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規格：96T/48T 34221-41-5刺甘草查爾酮品牌 Echinatin

小鼠組胺H4受體(HRH4)ELISA試劑盒，英文名： HRH4 ELISA Kit 94356-26-0曲劄茋苷規格 3,5,3’,4’-trihydroxy-stilbene -3’-b-D-glucoside

山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒GoatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T 30197-14-9去氧土大黃苷 Deoxyrhapontin

犬素B2(TXB2)試劑盒 Canine Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit 510-30-5刺囊酸說明書 Echinocystic acid

英文名稱Mouse15-lipoxygenaseELISAKit小鼠15-脂加氧酶(15-LO)規格：96T/48T 114902-16-8刺五加皂甙B品牌 Ciwujianoside B

76-66-4鈎藤堿品牌 Rhyncholphylline 組織1脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量檢測試劑盒20

76475-17-7Croverin規格 Croverin 組織1脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量檢測試劑盒20

76474-56-1二氫姜黃素品牌 DihydrocurcuMin 組織1脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量檢測試劑盒20

76296-75-8重樓皂苷VII品牌 Polyphyllin VII 組織1脂酶D(PhospholipaseD)總活性熒光定量檢測試劑盒20

76296-72-5重樓皂苷II Polyphyllin II 組織1脂酶D(PhospholipaseD)總活性比色法定量檢測試劑盒20

EPI300 電擊感受态細胞操作方法：

1. DH5α感受态細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鍾後待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接産物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鍾。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鍾，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻後37℃，200 rpm複蘇60分鍾。
4. 5000 rpm離心一分鍾收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并塗布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.将平闆倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，将平闆放37℃培養至少15小時。

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