人抗白蛋白抗體ELISA檢測試劑盒檢測方法
發表時間:2025-03-12
在樣本處理完畢後,即可進入正式的ELISA檢測步驟。首先,将處理好的樣本和标準品分别加入預先包被有白蛋白的96孔闆中,每個孔中加入的體積需嚴格按照說明書操作,以确保結果的準确性。随後,輕輕晃動孔闆,使樣本或标準品均勻覆蓋孔底,然後置于37℃恒溫箱中孵育一段時間,讓抗體與白蛋白充分結合。
孵育結束後,取出孔闆,棄去孔内液體,并用洗滌液反複洗滌數次,以去除未結合的抗體和雜質。洗滌完畢後,向每個孔中加入酶标二抗,同樣置于37℃恒溫箱中孵育。酶标二抗能夠與已結合在白蛋白上的抗體特異性結合,爲後續的顯色反應做準備。
孵育結束後,再次洗滌孔闆,然後加入顯色底物。在酶的作用下,顯色底物會發生顔色變化,且顔色深淺與樣本中抗白蛋白抗體的含量成正比。因此,通過觀察顔色變化并測定吸光度值,即可間接反映樣本中抗白蛋白抗體的含量。
最後,使用酶标儀在特定波長下測定各孔的吸光度值,并根據标準品的吸光度值繪制标準曲線。通過對比樣本的吸光度值與标準曲線,即可計算出樣本中抗白蛋白抗體的具體濃度。
整個檢測過程需嚴格控制實驗條件,避免污染和誤差,以确保檢測結果的準确性和可靠性。